組合RhoA/Rac1/cdc42 活化檢測(cè)試劑盒

       小G蛋白家族中最重要的是Rho家族蛋白中的Rac1、RhoA和Cdc42, 這三種蛋白相互協(xié)調(diào)、相互依賴(lài),共同調(diào)節(jié)骨架蛋白的結(jié)構(gòu)重組和形成, RhoA/Rac1/Cdc42的作用相反,Rac1/Cdc42對(duì)神經(jīng)元的發(fā)生、遷移、生長(zhǎng)、維持等起到促進(jìn)作用,而RhoA對(duì)神經(jīng)元的形成和維持起到抑制作用。體內(nèi)Rho有兩種形式,即GDP結(jié)合的無(wú)活性狀態(tài)與GTP結(jié)合的活性狀態(tài)。并且,通過(guò)體內(nèi)三類(lèi)蛋白,即鳥(niǎo)苷酸轉(zhuǎn)換因子(guaninenucleotide exchange factor,GEF)、GTPase激活因子(GTPase activating protein,GAP)與鳥(niǎo)甘酸解離抑制子(guanine nucleotide dissociation inhibitor,GDI),有序地調(diào)控Rho蛋白活性狀態(tài)的轉(zhuǎn)換。它還參與許多生理活動(dòng)，包括細(xì)胞遷移、粘附、胞質(zhì)分裂、增殖、分化和凋亡，并在更大程度上參與細(xì)胞轉(zhuǎn)化,在肌動(dòng)蛋白細(xì)胞中, Cdc42,Rho,Rac在信號(hào)傳導(dǎo)的過(guò)程中起著重要的作用。學(xué)習(xí)他們之間的串?dāng)_和互相之間的反饋對(duì)研究他們之間的相互反應(yīng)可以提出很多不錯(cuò)的建議。同時(shí)，對(duì)Rho蛋白家族的時(shí)空動(dòng)力學(xué)的觀測(cè)可以為空間極性和Cdc42/Rac和Rho提供證據(jù).

組合RhoA/Rac1/cdc42 活化檢測(cè)試劑盒的用途：
 

 研究 Rac1 ,RhoA,和 Cdc42 信號(hào)通路之間的細(xì)胞型特異性串?dāng)_。
 研究 Rho 家族小G蛋白激活 對(duì)其他信號(hào)通路的影響。
 體內(nèi) Rac1/RhoA/Cdc42 激活水平的分析。
 檢測(cè)增強(qiáng) Rac1/RhoA/Cdc42 活性的化合物和蛋白質(zhì)。
 檢測(cè)抑制 Rac1/RhoA/Cdc42 活性的化合物和蛋白質(zhì)。
 對(duì)細(xì)胞(組織) 中的Rac1/RhoA/Cdc42  的活性進(jìn)行定位,定量,定性分析 

組合RhoA/Rac1/cdc42 活化檢測(cè)試劑盒的原理：

Rac1激活檢測(cè)原理：利用特異性識(shí)別Rac1-GTP空間構(gòu)象的單克隆抗體，能夠與細(xì)胞或者組織中的蛋白的GTP 空間構(gòu)象結(jié)合，然后然后利用Protein A/G將抗原抗體的結(jié)合物吸附下來(lái)，再利用特異性識(shí)別 Rac1的兔多克隆抗體進(jìn)行免疫印跡分析進(jìn)行檢測(cè)。
RhoA激活檢測(cè)原理：利用特異性識(shí)別RhoA-GTP空間構(gòu)象的單克隆抗體，能夠與細(xì)胞或者組織中的蛋白的GTP 空間構(gòu)象結(jié)合，然后然后利用Protein A/G將抗原抗體的結(jié)合物吸附下來(lái)，再利用特異性識(shí)別 RhoA的兔多克隆抗體進(jìn)行免疫印跡分析進(jìn)行檢測(cè)。
Cdc42激活檢測(cè)原理：利用特異性識(shí)別cdc42-GTP空間構(gòu)象的單克隆抗體，能夠與細(xì)胞或者組織中的蛋白的GTP 空間構(gòu)象結(jié)合，然后然后利用Protein A/G將抗原抗體的結(jié)合物吸附下來(lái)，再利用特異性識(shí)別 cfc42的兔多克隆抗體進(jìn)行免疫印跡分析進(jìn)行檢測(cè)。

Rac1 激活示例圖片：

RhoA激活示例圖片：

 Cdc42 激活示例圖片：

                       與傳統(tǒng)的 GST- pull down 方法相比，該試劑盒具有以下明顯優(yōu)勢(shì)

1.靈敏度高；誘導(dǎo)蛋白與目標(biāo)蛋白中的結(jié)合對(duì)蛋白量的要求比較高。而抗體與蛋白的結(jié)合對(duì)樣本中蛋白的要求比較少。

2. 特異性強(qiáng)；因?yàn)檎T餌蛋白是需要加上GST標(biāo)簽的重組蛋白，所以是非生理狀態(tài)下的驗(yàn)證，蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和形式可能與天然狀態(tài)下存在一定差異，而抗體與目標(biāo)蛋白的結(jié)合 ，活細(xì)胞狀態(tài)下蛋白質(zhì)之間的相互作用被保持，所以其反映的是細(xì)胞中真實(shí)的蛋白情況.

3. 應(yīng)用更為廣泛；試劑盒中能夠特異性識(shí)別GTP結(jié)合狀態(tài)的三聚體G蛋白或者小G蛋白的單克隆抗體，適應(yīng)各種種屬（Human，Mouse，Rat，Rice plants，Pig Cotton，bacteria，Escherichia coli等）應(yīng)用范圍非常廣泛（ IP ,WB ,IHC IF ICF,ICC,IHF.FC,Elisa 等）隨著這些應(yīng)用的普及，G 蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究進(jìn)展，必將進(jìn)一步加快。